现代分子生物学检测技术首先面临的问题就是如何从复杂多样的生物样本中迅速有效的分离和提取所需要的基因组核酸,提取后的核酸质量会直接影响到随后的实验结果。
目前临床上常见的核酸提取方法如下:
离心柱法
通过特殊硅基质吸附材料,能够特定吸附DNA,而RNA和蛋白质顺利通过,然后利用高盐低PH结合核酸,低盐高PH值洗脱,来分离纯化核酸。离心柱法是核酸提取试剂盒提取中广泛使用的方法,提取纯度高,但是仍存在缺点:高度依赖吸附膜的结合能力;洗脱不完全导致核酸流失;容易交叉污染;单批次提取耗时较长,不容易实现自动化。
煮沸裂解法
一般用于DNA的手工提取,分为一步法和两步法。煮沸裂解法成本低,操作繁琐,实验流程比较多,所以核酸提取时间比较长,该方法抑制物多,降低了灵敏度,影响重复性,核酸链易断裂,提取物含大量核酸片段,另外,煮沸法提取核酸有一个加热过程,容易产生气溶胶污染,在临床上基本已弃用。
免提取法
该方法没有核酸提取和纯化过程,通过化学裂解的方法,直接在八连管内完成细胞裂解,核酸释放,蛋白质和脂质的沉积。该方法手工操作简单,但是由于没有核酸的纯化过程,检测灵敏度较常规方法低,干扰物质较多,无法适用于复杂样本,不推荐该方法用于核酸纯度要求较高的检测项目。
纳米磁珠法
运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后,制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性,在Chaotropic盐(盐酸胍、异硫氰酸胍等)和外加磁场的作用下,从样本中分离出DNA和RNA。
磁珠法不使用酚,氯仿,能够实现高通量操作和自动化,操作简单,用时短,核酸提取浓度较高,纯度较好,且成本低廉,是目前临床大量常规使用的提取方法。
目前临床上大量使用的磁珠提取方法主要分为以下三个步骤:第一,利用裂解液促使细胞破碎,释放出细胞中的核酸,第二,把释放的核酸吸附到特定的载体上,该载体对核酸有较强的吸附力和亲和力,而对其他的的生化组分,例如蛋白质,多糖,脂类没有亲和力和吸附力,第三,将附在在特定载体的核酸洗脱下来,从而得到纯化后的核酸。
核酸提取的纯度和质量直接影响着核酸检测的结果,在整个核酸检测环节中至关重要。磁珠法的核酸提取试剂,核酸提取效率高,容易实现自动化,已经成为市场主流。卓诚惠生隆重推出磁珠法全自动核酸提取预分装试剂,满足实验室的核酸提取需求。
试剂优势
1.核酸提取速度快
卓诚惠生核酸提取试剂最快13分钟可完成一批次提取,兼顾效率与效果,多种核酸项目检测只需一次核酸提取,大大节约了人工操作时间。
2.提取试剂可用样本类型多
卓诚惠生提取试剂可提取血清,血浆,咽拭子,培养物,尿液,痰液等样本中的DNA和RNA。
3.提取过程操作简单
卓诚惠生核酸提取试剂操作简单,提取试剂预分装,仅需添加样本,无需添加蛋白酶K,即可完成样本核酸提取。
4.提取核酸重复性好
磁珠法重复提取20次低浓度甲乙流培养物,检测Ct值CV值分别为1%和0.6%,显示出良好的重复性
磁珠法提取甲流20次扩增曲线
磁珠法提取乙流20次扩增曲线
5.提取覆盖范围覆盖度广
手足口咽拭子10倍梯度稀释,提取5个浓度,线性良好,覆盖线性范围广
6.适用机型:
卓诚惠生提取试剂使用多款32,48,96通道核酸提取仪器,轻松试用,质量保证。
货号信息
货号
名称
规格
CN8043(I)
核酸提取试剂(预分装I)
32人份/盒,48人份/盒,64人份/盒
CN8043(II)
核酸提取试剂(预分装II)
96人份/盒
CN8043(III)
核酸提取试剂(预分装III)
32人份/盒,48人份/盒,64人份/盒
CACLP展位号:A5-T09
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